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      大鼠17-羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒

      大鼠17-羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒
      適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型,不需要任何分離步驟,操作十分簡便、快速,數分鐘便能得出結果,酶免疫測定方法操作時,所有反應試劑均在同一體系內進行。
      特異性強高效可靠
      重復性好,特異性強,靈敏度高
      準確穩定,免費代測
      質量保證,量大從優
      僅供科研使用,不能應用于臨床

      • 更新時間:2024-06-25
      • 產品型號:96T/48T
      • 廠商性質:生產廠家
      • 訪  問  量:554
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      聯系電話:19121610072

      詳細介紹

      大鼠17-羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒

      檢測方法:酶聯免疫法

      品牌:佰利萊

      標記物:HRP標記物

      應用:定性/定量/酶活檢測

      貯藏條件:2-8℃

      有效期:6個月

      標本:血清、血漿、組織液、組織勻漿等


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      一、組織勻漿的制備 

      1、取組織塊(0.1g~0.5g)最少可到5~10mg在冰冷的PBS中漂洗,濾紙拭干,準確稱重,放入5ml的勻漿管中。 

      2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。 

      3、勻漿的方式:手工勻漿,機器勻漿。 

      ① 手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉動研磨數十次(6~8分鐘),充分研碎,制成10%的勻漿液。 

      ② 機器勻漿:用組織搗碎機10000~15000 轉/分 上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內切式組織勻漿機制備(勻漿時間10秒/次,間隙30秒,連續3~5次,在冰水中進行,可適當延長勻漿時間),鏡檢觀察:

      4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機3000轉/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進行測定.

      二、勻漿介質  一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸鹽緩沖液(PBS),客戶可根據樣本及測定指標的情況自行設定濃度,目的是保持樣本的等滲環境。

      三、樣本保存:         

      植物組織樣本暫時不測定,可立即低溫凍存,溫度越低越好,中間如反復凍融,-20℃以下可保 存三個月,-70℃以下可保存六個月

      試劑準備:

      試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。

      1.標準品復溶:試劑盒提供6管標準品,每管已標定濃度,并且凍干。實驗前在每個標準品管中加入0.5mL稀釋液,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動助其溶解,使其恢復為每個標準品管身標注的濃度。

      2. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

      試劑盒自備材料:

      1)蒸餾水。

      2)加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

      3)振蕩器及磁力攪拌器等。


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      大鼠17-羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒 

      細胞樣品前處理:

      a)對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。

      b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。

      c)對于組織樣品: 把組織剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。

      用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

      2、后處理:

      將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的ELISA、Western和免疫沉淀等操作。

      免責聲明:

      1.   試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。

      2.   嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。

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